Voruntersuchung zur Anwendung immunaktivierter mesenchymaler Stromazellen bei rezidivierender Uveitis des Pferdes

UVEA Davis – Die rezidivierende equine Uveitis (ERU), eine immunvermittelte Erkrankung, die durch wiederholte Episoden intraokulärer Entzündung gekennzeichnet ist, betrifft 25% der Pferde in den USA und ist die häufigste Ursache für Glaukom, Katarakt und Blindheit. Mesenchymale Stromazellen (MSCs) besitzen immunmodulatorische Eigenschaften, die durch Vorkonditionierung mit Toll-like-Rezeptor-Agonisten hochreguliert werden. Ziel war es, die Sicherheit und Migration von TLR-3-agonistischen MPCs, die mit Polyinosin-Polycytidyl-Säure (Poly I:C) aktiviert wurden, zu untersuchen. Die Gruppe um Jennifer M. Cassano vom Veterinary Institute for Regenerative Cures an der School of Veterinary Medicine der University of California in Davis, Davis, Vereinigte Staaten, injizierte diese MSCs gesunden Pferden subkonjunktival – vor der klinischen Anwendung bei Pferden mit ERU. Die Forscher gingen davon aus, dass aktivierte allogene MSCs, die subkonjunktival injiziert werden, keine okuläre oder systemische Entzündung auslösen und für mehr als 14 Tage in der Bindehaut verbleiben würden.

Bei zwei Pferden wurden 10 × 106 Poly I:C-aktivierte GFP-markierte MSC eines Spenders dreimal im Abstand von zwei Wochen in die bulbäre Subkonjunktiva injiziert. Die Trägersubstanz (Kochsalzlösung) wurde zur Kontrolle in die kontralaterale Bindehaut injiziert. Die Pferde wurden alle 1 bis 3 Tage körperlich und ophthalmologisch untersucht [Spaltlampen-Biomikroskopie, Rebound-Tonometrie, Fundusuntersuchung und semiquantitatives präklinisches okuläres Toxikologie-Scoring (SPOTS)]. Die systemische Entzündung wurde mittels CBC, Fibrinogen und Serum-Amyloid A (SAA) bestimmt. Die Pferde wurden 14 Tage nach der letzten Injektion euthanasiert. Eine vollständige Autopsie und Histopathologie wurde durchgeführt, um das Augengewebe und 36 systemische Organe auf das Vorhandensein von MSCs mittels IVIS® SpectrumCT zu untersuchen. Das Augengewebe wurde immunhistochemisch auf GFP untersucht.

Bei den körperlichen Untersuchungen wurden keine Veränderungen festgestellt. Die Blutuntersuchungen ergaben Fibrinogenwerte zwischen 100 und 300 mg/dL (Referenzbereich 100 – 400) und SAA-Werte zwischen 0 und 25 μg/mL ((Referenzbereich 0 – 20). Die okulären Auswirkungen der subkonjunktivalen Injektion waren bei den MSC- und Kontroll-Augen im SPOTS-Bewertungssystem ähnlich, mit beidseitiger Bindehauthyperämie, Chemosis und Augenausfluss festgestellt wurden, die sich ohne Intervention innerhalb von 14 Tagen besserten. Alle anderen okulären Parameter blieben während der gesamten Studie unverändert. Autopsie und Histopathologie ergaben keine Hinweise auf eine systemische Entzündung. Die okuläre Histopathologie war bei MSC- und Kontroll-Augen ähnlich. In der Fluoreszenzanalyse konnten keine MSCs lokalisiert werden. Die Immunhistochemie konnte keine intakten MSCs in der Bindehaut identifizieren, jedoch waren GFP-markierte Zellbestandteile in den phagozytischen Zellen der Bindehaut vorhanden.

In der im Dezember 2023 beim Fachjournal FRONTIERS IN VETERINARY SCIENCE erschienenen Publikation fassen die Autoren zusammen, dass allogene Poly I:C-aktivierte konjunktivale MSC-Injektionen gut vertragen wurden. Durch GFP-Markierung konnten MSC-Komponenten identifiziert werden, die subkonjunktival von Immunzellen phagozytiert wurden. Diese vorläufigen Informationen zur Sicherheit und Lokalisation sind von entscheidender Bedeutung für die weitere Entwicklung von Immunzelltherapien in klinischen Studien an Pferden. (bs)

Autoren: Cassano JM, Leonard BC, Martins BC, Vapniarsky N, Morgan JT, Dow SW, Wotman KL, Pezzanite LM. Korrespondenz: Jennifer M. Cassano, Veterinary Institute for Regenerative Cures, School of Veterinary Medicine, University of California, Davis, Davis, CA, USA. E-Mail: jmcassano@ucdavis.edu Studie: Preliminary evaluation of safety and migration of immune activated mesenchymal stromal cells administered by subconjunctival injection for equine recurrent uveitis. Quelle: Front Vet Sci. 2023 Dec 14;10:1293199. doi: 10.3389/fvets.2023.1293199. PMID: 38162475; PMCID: PMC10757620. Web: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fvets.2023.1293199/full